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基因工程中常利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似。下列关于PCR的叙述，错误的是（）

A．用PCR技术扩增目的基因时无需知道目的基因的全部序列

B．PCR过程所需缓冲液中需要添加Mg²⁺用于激活DNA聚合酶

C．经过四轮循环，产物中只含有1种引物的DNA片段所占比例为1/16

D．若复性温度过高可能导致引物与模板DNA不能结合，进而无扩增产物

类型：选择题

难度系数：较易0.85

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科研人员欲将某目的基因导入大肠杆菌质粒中保存，该质粒上有EcoR I、Xho I、Mun I、Sal I和Nhe I限制酶识别序列，质粒和目的基因的结构图示如下。下列相关叙述错误的是（）

注：Lac Z基因编码产生的β-半乳糖苷酶可以分解X-ga I产生蓝色物质，使菌落呈现蓝色，否则菌落为白色。

A．构建的重组质粒中PO位于目的基因的上游，转录方向为顺时针

B．在设计PCR引物时，应在两种引物上添加Xho I和Mun I限制酶识别序列

C．在添加氨苄青霉素和X-ga I的培养基上，导入重组质粒的大肠杆菌形成白色菌落

D．图中质粒还应有终止密码子序列，使目的基因翻译终止

类型：选择题

难度系数：一般0.65

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科研人员通过农杆菌中的质粒将多种耐盐基因导入野生型水稻，获得了一批耐盐转基因水稻。下列相关叙述正确的是（）

A．该转基因水稻与原野生型水稻为两个不同物种

B．耐盐基因的筛选与获取是培育转基因水稻的核心步骤

C．抗原—抗体检测可以检测出耐盐转基因水稻是否成功表达出相关蛋白质

D．只要检测出水稻细胞中含有耐盐基因就代表耐盐水稻培育成功

类型：选择题

难度系数：一般0.65

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对水稻品种“淮稻7号”诱变获得突变体植株（基因型为aa．a基因位于9号染色体上），分析突变体的a基因全序列及其编码产物发现，突变体的a基因是野生型水稻的A基因内插入654 bp（碱基对）片段形成的。比对水稻基因组发现．野生型水稻的3号染色体上也存在上述654 bp序列。为探究突变体产生的原因，在野生型水稻的3号染色体和突变体水稻的9号染色体上654 bp序列外侧各设计一对引物，对野生型和突变体基因组DNA分别进行PCR，产物的凝胶电泳结果如图（M为核酸分子量大小的标准参照物）。下列相关叙述正确的是（）

A．图示结果在自然条件下就能观察到

B．配置好的琼脂糖溶液需冷却至30℃后才能倒入模具

C．在凝胶中DNA分子的迁移速率只与DNA分子大小有关

D．突变体的形成是因为3号染色体上的654 bp序列移接到了9号染色体上

类型：选择题

难度系数：一般0.65

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人白细胞介素-2（IL-2）是一种细胞因子，含有3个半胱氨酸，分别位于第58、105、125位，其中58位与105位半胱氨酸之间形成的二硫键对保持IL-2活性起重要作用。科学家利用蛋白质工程将IL-2基因中编码125位半胱氨酸的序列改造为丝氨酸序列，获得了新IL-2．下列相关叙述错误的是（）

A．新IL-2可以降低二硫键错配的概率

B．新IL-2的改造工程遵循的原理是基因重组

C．新IL-2是依据蛋白质的功能改造其结构得到的

D．新IL-2的改造过程的直接操作对象是基因

类型：选择题

难度系数：一般0.65

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术后伤口的强烈疼痛折磨着患者，芬太尼作为一种强效镇痛药在临床上被广泛应用，其镇痛机制如图所示。回答下列问题：

“+”表示促进；“-”表示抑制。
(1)术后伤口产生痛觉的部位位于______，该过程不属于反射，原因是________。
(2)兴奋在如图结构中______（填“单向”或“双向”）传递，原因是__________。图中K⁺外流会导致该处膜电位表现为__________________。
(3)据图分析，芬太尼进入机体后的作用过程为：__________，从而具有镇痛作用。
(4)请结合图示过程，提出一个不同于芬太尼的研发镇痛药物的新思路：_________。

类型：非选择题

难度系数：较易0.85

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黄河三角洲是黄河入海前的冲积平原，是由黄河携带大量泥沙流入渤海与莱州湾的交汇处时流速减缓，在入海口泥沙淤积形成的三角洲。如图为黄河三角洲东营红滩滨海湿地的部分能量流动图[单位：MJ/（m²·a）]，回答下列问题：

(1)净光合作用=______-______，用于该湿地植被生长、发育、繁殖的能量为______MJ/（m²·a）。若A表示下一营养级同化的能量，则该湿地第一营养级和第二营养级间的能量传递效率为______（保留两位小数）。
(2)黄河三角洲生态系统会受到人类生产、生活和其他方面的影响，但牛羊等动物种群与牧草及其天敌的数量都能长时间保持着相对的稳定，这反映了生态系统的______稳定性，这种稳定性的基础是生态系统中普遍存在______机制。
(3)黄河三角洲虾塘中常采用南美白对虾与罗氏沼虾混养的模式，罗氏沼虾可以清除养殖残饵、吞食病残的南美白对虾，这种混养模式的优点是____________。
(4)黄河三角洲国家级自然保护区中对很多珍稀鸟类进行保护属于_____保护。生态系统为野生生物提供良好栖息地等功能体现了生物多样性的______价值。

类型：非选择题

难度系数：一般0.65

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来源于猪等动物的异种器官被视作人类供体器官短缺的希望，相比同种器官，异种器官移植面临受体对植入器官更严重的免疫排斥等难题。通过基因敲除手段获得基因敲除猪，可获得消除或减弱排斥反应的适合人体移植的猪器官，部分过程如图所示。回答下列问题：

(1)图示过程属于______（填“无性”或“有性”）生殖过程，与选用组织细胞相比，过程一选用猪的胚胎干细胞的优点是______________。
(2)过程二通常需要用促性腺激素处理，目的是________________，卵母细胞去核的方法是____________。
(3)若想要获得两个或多个基因敲除猪，在过程六之前应进行______操作，代孕猪应具备____________（答两点）条件。
(4)异种器官移植除了严重的免疫排斥外，可能还有__________________（答一点）等难题需要解决。

类型：非选择题

难度系数：一般0.65

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稻瘟病是由真菌感染引起的导致水稻减产的常见疾病，研究发现花生细胞中的S基因在抗真菌类病害中发挥着重要作用。科研人员提取花生细胞中S基因的mRNA，逆转录得到cDNA，通过转基因技术，以Ti质粒为表达载体，导入水稻外植体细胞中，使水稻获得了对真菌的抗性，部分结构如图所示。回答下列问题：

(1)通过逆转录获得的S基因与花生细胞中的S基因的DNA序列____________（填“完全一致”或“不完全一致”），原因是___________。
(2)在利用PCR技术扩增目的基因时需要一对特异性引物，引物是指____________。PCR反应中的每次循环可分为变性、复性、延伸三步，其中变性的目的是____________。
(3)为了成功构建重组表达载体，确保目的基因插入载体中方向正确，最好选用______酶切割S基因的cDNA和载体。形成的重组Ti质粒需要先导入农杆菌细胞，再侵染水稻的愈伤组织，理由是_________。
(4)转基因水稻是否表现出了抗真菌性，需要进行个体水平的检测，检测的方法是____________。

类型：非选择题

难度系数：一般0.65

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T4溶菌酶是一种重要的工业用酶，但是它在温度较高时容易失去活性。为了提高T4溶菌酶的耐热性，科学家首先对影响T4溶菌酶耐热性的一些重要结构进行了研究。然后以此为依据对相关基因进行改造，使T4溶菌酶的第3位异亮氨酸变为半胱氨酸。第3位半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之间形成了一个二硫键，使T4溶菌酶的耐热性得到了提高。回答下列问题：
(1)基因工程中获取目的基因的常用方法有_______（答一点）和PCR等。
(2)通过分析T4溶菌酶的氨基酸序列，可人工合成编码T4溶菌酶的脱氧核苷酸序列，该序列______（填“是”或“不是”）唯一的，原因是_____________。
(3)将获得的T4溶菌酶中改良的基因进行PCR扩增，目前在PCR体系中使用Taq酶而不使用哺乳动物体内的DNA聚合酶的主要原因是________。采用PCR技术对一个DNA进行扩增时，第n次循环共需要引物______个。若鉴定发现其中有许多种相对分子质量与T4溶菌酶基因存在差异的DNA片段，则原因可能是_____________（答一点）。

类型：非选择题

难度系数：一般0.65

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