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干扰素具有干扰病毒复制作用，对治疗乳腺癌、淋巴癌、多发骨髓瘤和某些白血病等也有一定的疗效。
I.下图为科研人员制备能合成干扰素的人参愈伤组织细胞的流程，①～④表示相关的操作，EcoRⅠ、BamHⅠ为限制酶，它们的识别序列及切割位点如下表所示。请回答：

限制酶	识别序列和切割位点
EcoR l	G↓AATTC
BamH l	G↓GATCC

(1)步骤①中常利用PCR技术获取和扩增干扰素基因，除含有干扰素基因的DNA片段之外，该过程需要提供_________以及引物。设计引物序列时的主要依据是_________，科研人员还需在两种引物的一端分别加上相应的碱基序列，以便于后续基因的剪切和连接，这两种碱基序列分别是_________。
(2)过程②所构建的基因表达载体中标记基因的作用是_________。
(3)过程③中需先用_________处理根瘤农杆菌，可使根瘤农杆菌处于_________的状态，以便将基因表达载体导入细胞。
(4)④过程检测人参愈伤组织细胞是否产生干扰素，所用的方法是_________。
II.干扰素在体外保存相当困难。科学家采用重叠延伸PCR技术，将干扰素基因中相应位点的C//G碱基对特定突变为G//C碱基对，从而使干扰素中的第17位氨基酸由半胱氨酸变成丝氨酸。该技术采用具有互补末端的引物，使PCR产物形成了重叠链，从而在随后的扩增反应中通过重叠链的延伸，将不同来源的扩增片段重叠拼接起来，获得定点突变的干扰素基因，然后导入受体细胞生产表达新的干扰素，这种改造的干扰素可在-70℃条件下保存半年。原理如图。

(5)利用重叠延伸PCR技术诱变干扰素基因时，将预期的突变碱基设计在PCR的引物3和引物4中，制备出“PCR体系1”和“PCR体系2”，分别进行PCR扩增。“PCR体系1”中加入的引物是_________。PCR体系1和PCR体系2必须分开进行的原因是_________。得到图中由c、d链构成的完整DNA分子至少需要“PCR体系2”进行_________次循环。
(6)将PCR体系1、2的产物（图中ab和cd）混合后，继续进行下一次PCR反应。在该PCR反应体系中经过高温变性后，当温度下降到55℃，能够互补配对的DNA链相互结合，理论上有_________种结合的可能，其中能进行进一步延伸的有_________种。