学进去

IKK 激酶由IKKα、IKKβ和IKKγ三种亚基组成，该酶参与动物体内免疫细胞的分化。临床上发现某重症联合免疫缺陷（SCID）患儿IKKβ基因编码区第1183位碱基T突变为C， 导致IKKβ上第395 位酪氨酸被组氨酸代替。为研究该患儿发病机制，研究人员应用大引物PCR定点诱变技术培育出 SCID 模型小鼠，主要过程如下图1、2。

(1)在PCR反应体系中，需要加入引物和IKKβ基因外，主要还需要加入______________等。可以通过_______________来初步鉴定PCR产物，还可将含有_____________的凝胶切割下来回收凝胶中的DNA，进一步通过 DNA 测序技术鉴定PCR产物。
(2)在图 1 获取突变基因过程中，需要以下 3 种引物：
引物A： 5'-CCCCAACCGGAAAGTGTCA-3'（下划线字母为突变碱基）
引物 B：5'-TAAGCTTCGAACATCCTA-3'（下划线部分为限制酶 HindIII识别序列）
引物C： 5'-GTGAGCTCGCTGCCCCAA-3'(下划线部分为限制酶SacI识别序列）
上述三种引物中，在PCR1中使用的引物有_____________、_____________，在PCR2中使用的引物有_____________，PCR2中另外一种引物是图中大引物的_____________（填“①”或“②”）链。
(3)图2模型鼠培育过程中杂合模型鼠（F₀）的培育涉及了一系列现代生物技术，下表是其中的一些步骤，请根据题意完成表格内容。

过程	实验目的	步骤要点
导入	a．处理突变基因与载体	①利用限制酶________（填“HindIII”、“SacI”、“HindIII和SacI”）处理突变基因和载体
	b．构建重组载体	利用DNA连接酶催化突变基因和载体连接
	c．导入目的基因	②通常利用________法将重组DNA导入小鼠受精卵
发育	d．胚胎体外培养	利用专用培养液培养受精卵，并检测其发育状况
	e．代孕获得小鼠	③选择体外培养至________，植入代孕母鼠子宫角，直至小鼠出生
	f．鉴定、筛选F0小鼠	利用PCR鉴定基因，筛选出杂合鼠F0

(4)图2所示的F₀小鼠若要在胚胎时期就确定其性别，则可取_____________细胞，进行_____________分析来判定。根据图2杂交结果，可以确认突变基因已经较稳定地整合到小鼠细胞的染色体上，在遗传时遵循_____________定律。研究人员对三种基因型小鼠胸腺淋巴细胞中组成IKK激酶的三种亚基进行提纯和电泳，结果如图3。请依据此结果提出SCID患者免疫缺陷产生的机制：_____________。